Cómo purgar el medio de cultivo celular con nitrógeno

Cómo purgar el medio de cultivo celular con nitrógeno

Estudios biológicos utilizan cultivos celulares para investigar los efectos de fármacos, terapias y prácticas en los ciclos de vida y actividad de las células. El crecimiento de las células y el mantenimiento de líneas celulares se producen en medios de cultivo que es beneficioso para las células en cuestión. Los medios de comunicación proporcionan todos los nutrientes y condiciones ambientales requeridas por las células. Mayoría de las células necesita una fuente de nitrógeno para mantenerse saludable y a proporcionar algunos de los requisitos para los procesos que las células experimentan durante su ciclo de vida. Mientras que el nitrógeno es de amoníaco y otras sustancias que contienen nitrógeno, purga los medios de comunicación también proporciona una fuente para el nitrógeno necesario.

Instrucciones

• Verter el medio de cultivo celular en un vaso grande y coloque el vaso en un agitador mecánico. El agitador mezcla el medio durante la purga por la corriente de nitrógeno. Este método permite una preparación de una gran cantidad de medios para mantener la composición uniforme más.

• Colocar un tubo de aspersión a la salida de un tanque de nitrógeno. Un tubo de aspersión se compone de un tubo de vidrio con una punta de cristal de scintered incorporada en el extremo del tubo. El extremo abierto del tubo conectado a una longitud de tubo conectado a un tanque de nitrógeno de plástico proporciona un flujo de nitrógeno como sale al final de cristal de scintered del tubo por muchas corrientes de burbujas diminutas de gas.

• Coloque el extremo de vidrio de scintered del aspersión tubo en la parte inferior del vaso y encienda el mezclador. Ajustar la velocidad de agitación del agitador mecánico para proporcionar incluso mezcla del medio.

• Encender el flujo de nitrógeno en el tanque y permita que la burbuja en el medio. El nitrógeno saturarán el medio con nitrógeno, se disuelve. Cada líquido posee una solubilidad finita de diferentes gases. Como el nitrógeno se disuelve en el medio, otros gases disueltos son expulsados al medio. Purgar elimina gases como oxígeno y dióxido de carbono del medio de cultivo.

• Permiten el flujo de nitrógeno a burbujear al menos 15 minutos para saturar el medio, dependiendo de la velocidad de flujo del gas. Una vez terminada la purga del medio, retire el tubo de cristal de scintered del vaso y transferencia al medio de cultivo celular purgado en un envase cerrado y almacenarlo en el refrigerador. La menor temperatura del refrigerador reduce el grado en que gases se disuelven en el medio durante el almacenamiento.


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